Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 是一種重要的生物素衍生物，在生物偶聯和親和純化等領域應用廣泛。以下是關于它的詳細介紹：
基本信息
結構式：
化學結構：其結構中含有磺酰基（Sulfo-）、N - 羥基琥珀酰亞胺酯（NHS-）和脫硫生物素（Desthiobiotin）部分。磺酰基使其具有良好的水溶性，NHS 酯可與氨基反應，脫硫生物素則能與鏈霉親和素等親和素特異性結合。
理化性質：通常為白色固體，密度約為 1.41g/cm3，酸度系數（pKa）約為 - 0.04，可溶于大部分有機溶劑，如 DCM、DMF、DMSO 等，在水中也有很好的溶解性。
作用機制：Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 中的 NHS 酯基團能與生物分子（如蛋白質、抗體、肽等）表面的氨基發生反應，形成穩定的酰胺鍵，從而將脫硫生物素標記到這些分子上。標記后的分子可利用脫硫生物素與鏈霉親和素的高親和力結合特性，進行后續的分離、純化和檢測。
主要應用
蛋白質標記與純化：通過與蛋白質的伯胺基團共價結合，標記后的蛋白質可通過鏈霉親和素樹脂捕獲，再利用生物素競爭性洗脫，溫和地將蛋白質從樹脂上分離下來，避免 harsh 條件損傷蛋白。
細胞表面標記：用于標記細胞膜蛋白時，長鏈間隔臂（LC）可減少空間阻礙，增強標記效率，適用于活細胞研究，后續可裂解 Desthiobiotin - 鏈霉親和素相互作用進行分離。
相互作用研究：在 pull-down 實驗中，將其偶聯到誘餌蛋白上，可捕獲與之結合的蛋白伴侶，用低 pH 或生物素溶液洗脫，能保留蛋白的天然構象，便于研究蛋白質之間的相互作用。
使用注意事項：應密封避光，儲存于 - 20℃以下、陰涼干燥通風處，避免頻繁解凍，現配現用。同時，要避免與含胺試劑（如 Tris、NaN?）等一起使用，以免干擾反應，并注意優化標記比例，減少多標記導致的蛋白聚集。
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2025-11-17
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