cas:129179-83-5,Biotin-HPDP,生物素-二硫吡啶的概述
2025-11-17
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Biotin-HPDP(生物素-二硫吡啶)是一種巰基反應性的生物素化試劑,以下是對其的詳細介紹:
一、基本信息
中文名稱:生物素-二硫吡啶
英文名稱:Biotin-HPDP
CAS號:129179-83-5
分子式:C24H37N5O3S3
分子量:539.78
外觀:固體
純度:≥95%
溶解性:水不溶性,需溶于二甲基亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)等有機溶劑后,再稀釋于水性緩沖液中使用。
結構式:
二、化學結構與特性
結構組成:由雙環生物素環結構、附著在生物素戊酸側鏈上的1,6-二氨基己烷,以及側鏈末端的巰基反應性基團(吡啶基二硫化物)共同組成。
反應活性:末端的吡啶基二硫化物能夠與蛋白或其他分子上的游離巰基(-SH)反應,形成穩定的二硫鍵,并釋放吡啶-2-硫酮。
可逆性:形成的二硫鍵可被還原劑(如二硫蘇糖醇,DTT)裂解,釋放原始未修飾的生物分子,適用于需要回收原始分子的實驗。
長側鏈優勢:長側鏈設計使生物素標記的分子能夠更好地與親和素(avidin)或鏈霉親和素(streptavidin)探針結合,提高檢測靈敏度。
三、操作注意事項
溶解與儲存:
需溶于DMSO或DMF等有機溶劑后,再稀釋于水性緩沖液中使用。避免頻繁解凍,建議分裝后-20℃以下冰凍保存。
溶解時可用37℃加熱試管并在超聲波水浴中震動片刻,以促進溶解。
反應條件:
在pH 6.5至7.5的緩沖液(如PBS)中反應效果較佳。避免使用含硫醇或二硫化物還原劑的緩沖液,以免干擾反應。
反應溫度通常為室溫或25℃,反應時間根據實驗需求調整(如90分鐘至數小時)。
未結合試劑的去除:
反應后需通過透析、超濾或柱層析等方法去除未結合的Biotin-HPDP,避免干擾后續實驗。
安全防護:
操作時需佩戴手套和護目鏡,避免直接接觸皮膚或眼睛。廢棄物需按實驗室安全規范處理。
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